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            產品展示   ProductsATCC細胞>>轉化細胞>>大鼠肝癌細胞;RH-35
             
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            產品名稱:
            大鼠肝癌細胞;RH-35
            產品型號:
            產品報價:
            產品特點:
            大鼠肝癌細胞;RH-35相關產品:人異質型核糖核蛋白復合物/抗RA33抗體(hnRNP/RA33)elisa酶聯(lián)免疫試劑盒價格
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              大鼠肝癌細胞;RH-35的詳細資料:

            公司細胞廣泛用于國內院校的細胞生物學研究,作為實驗項目研究。下列產品詳細介紹:

            產品名稱

            生長特性

            貨號

            大鼠肝癌細胞;RH-35

            貼壁生長

            EY-X63593

            細胞名稱  大鼠肝癌細胞;RH-35
            形態(tài)特性: 上皮細胞樣

            生長特性: 貼壁生長

            特征特性: RH-35細胞株源自由N-2feuorenyldiuctamid在雄性AxC大鼠中誘導的可移植ReulierH-35肝癌。細胞較小,提供者稱饑餓24小時可以使其同步。

            培養(yǎng)條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)胎牛血清,10%

            傳代方法: 消化3-5分鐘。1:2。3天內可長滿。

            傳代情況: PN

            凍存條件: 基礎培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

            支原體檢測: 陰性
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            冷凍保存細胞之方法
            冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
            冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
            實驗要點及說明:
            1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法; 
            2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃,并經過鉻酸洗液處理; 
            3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 
            4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率; 
            5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
            實驗報告:
            一、分離與培養(yǎng):
            1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
            2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
            3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
            4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
            5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
            二、免疫熒光鑒定:
            1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
            2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
            3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
            4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
            5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
            6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
            Cryphonectria parasitica (Murrill) Barr, te ..細胞名稱: 人腎透明細胞癌細胞;UT14 10%FBS

            Tetrahymena tropicalis Nanney and McCoy細胞名稱: 人腎透明細胞癌細胞;UT16 10%FBS

            Homo sapiens, human skin, foreskin細胞名稱: 人腎透明細胞癌細胞;UT48 10%FBS

            Serpula lacrymans (Wulfen : Fries) Schroeter細胞名稱: 人腎透明細胞癌細胞;UT44 10%FBS

            Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..細胞名稱: 螢光素酶標記的人結直腸癌細胞;HCT116-LUC-28 DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS+200ug/mlHygromycin

            Candida albicans (Robin) Berkhout細胞名稱: 人腎透明細胞癌細胞;UT33a 10%FBS

            Homo sapiens, human細胞名稱: 螢光素酶-紅色熒光蛋白標記的人癌細胞;MDA-MB-231-Luc2-tdT RPMI1640(w/oHepes)10%FBS+200ug/mlG418

            Mycosylva setosa Udagawa et Furuya細胞名稱: 缺氧誘導的綠色熒光蛋白標記的人癌細胞;MCF7-hiGFP-12C DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS+200ug/mlG418

            Eremothecium coryli (Peglion) Kurtzman細胞名稱: 缺氧誘導的綠色熒光蛋白標記的人癌細胞;MCF7-hiGFP-130C DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS+200ug/mlG418

            Campylobacter jejuni subsp.jejuni (Jones ..細胞名稱: 螢光素酶標記的人結直腸癌細胞;HCT116-LUC-22 DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS+200ug/mlHygromycin

            Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..細胞名稱: 缺氧誘導的綠色熒光蛋白標記的人癌細胞;MDA-MB-231-hiGFP-5C RPMI1640(w/oHepes)10%FBS+200ug/mlG418

            Ustilago maydis (DeCandolle) Corda, teleomo ..細胞名稱: 缺氧誘導的綠色熒光蛋白標記的人癌細胞;MDA-MB-231-hiGFP-10C RPMI1640(w/oHepes)10%FBS+200ug/mlG418

            Pseudomonas aeruginosa (Schroeter) Migula細胞名稱: 缺氧誘導的綠色熒光蛋白標記的小鼠癌細胞;Ca761-hiGFP-3C DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)5%FBS+200ug/mlG418

            Stagonospora gigaspora (Niessl) Saccardo細胞名稱: 缺氧誘導的綠色熒光蛋白標記的小鼠癌細胞;Ca761-hiGFP-1C2 DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)5%FBS+200ug/mlG418

            Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..細胞名稱: 表達人性成纖維細胞生長因子的人癌細胞;MCF7-bFGF-EGFP DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS

            Homo sapiens, human細胞名稱: 表達人性成纖維細胞生長因子的小鼠癌細胞;Ca761-bFGF-EGFP DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS
            大鼠肝癌細胞;RH-35人神經保護因子(CVNPF)ELISA試劑盒TRAILR4ELISAKit產品規(guī)格:48T/96T。

            人神經細胞粘附分子配體1(NCAM-L1/CD171)ELISA試劑盒TRAIL-R4ELISAKit產品規(guī)格:48T/96T。

            人抗補體1q抗體(C1q)ELISA試劑盒TRELISAKit產品規(guī)格:48T/96T。

            人細胞素(CTX)ELISA試劑盒TRELISAKit產品規(guī)格:48T/96T。

            人細胞性T淋巴細胞相關抗原4(CTLA-4/CD152)ELISA試劑盒TRELISAKit產品規(guī)格:48T/96T。

            人殺菌性/通透性增加蛋白(BPI)ELISA試劑盒TRELISAKit產品規(guī)格:48T/96T。

            人利鉀尿肽(KP)ELISA試劑盒TRELISAKit產品規(guī)格:48T/96T。

            人血清素/血清胺(ST)ELISA試劑盒TREM-1ELISAKit產品規(guī)格:48T/96T。
            操作步驟:
            1、貼壁細胞的消化
            ①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
            ②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
            ③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
            化;或者用槍吹打細胞發(fā)現細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的  *細胞培養(yǎng)液,吹打下細胞,即可直接用于后續(xù)實驗。
            ④如果發(fā)現消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
            ⑤如果發(fā)現細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細胞,即可用于后續(xù)實驗。
            2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。

             

            產品相關關鍵字: 大鼠肝癌細胞 RH-35
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