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            產(chǎn)品展示   ProductsATCC細胞>>轉(zhuǎn)化細胞>>肺癌細胞;L1022
             
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            產(chǎn)品名稱:
            肺癌細胞;L1022
            產(chǎn)品型號:
            產(chǎn)品報價:
            產(chǎn)品特點:
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              肺癌細胞;L1022的詳細資料:

            公司細胞廣泛用于國內(nèi)院校的細胞生物學研究,作為實驗項目研究。下列產(chǎn)品詳細介紹:

            產(chǎn)品名稱

            生長特性

            貨號

            肺癌細胞;L1022

            貼壁生長

            EY-X63987

            細胞名稱  肺癌細胞;L1022
            形態(tài)特性: 上皮細胞樣

            生長特性: 貼壁生長

            特征特性: 該細胞屬保藏,其特征特性尚未公開。

            培養(yǎng)條件: McCoy's5AMedia(ModifiedwithTricine)10%FBS

            傳代方法: 1:3~1:8傳代;每周2~9次。

            傳代情況: C4

            凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

            支原體檢測: 陰性
            ?
            冷凍保存細胞之方法
            冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
            冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
            實驗要點及說明:
            1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法; 
            2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理; 
            3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 
            4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率; 
            5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
            實驗報告:
            一、分離與培養(yǎng):
            1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
            2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
            3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
            4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
            5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
            二、免疫熒光鑒定:
            1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
            2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
            3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
            4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
            5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
            6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
            可溶性核因子κB受體活化因子配基檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yǎng)條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)新生牛血清,10%soluble receptor activator of nuclear factor-kB ligand

            可溶性腺苷環(huán)化酶檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yǎng)條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)馬血清,10%Soluble Adenylate Cyclase

            裂解型糖基化終末產(chǎn)物受體檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yǎng)條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)新生牛血清,10%cleaved Receptor for Advanced Glycation Endproducts

            淋巴素α檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%Lymphotoxinα

            磷二酯酶3B檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yǎng)條件: Medium200+LSGSphosphodiesterases 3B

            磷甘油激酶檢測試劑盒生長特性: 懸浮生長培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)新生牛血清,10%Phosphoglycerate kinase

            磷化酪氨羥化酶檢測試劑盒生長特性: 懸浮生長培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)胎牛血清10%phospho-tyrosine hydroxylase

            磷化血管內(nèi)皮生長因子受體2檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)新生牛血清,10%;10ug/ml人重組insulinphospho-Vascuoar endothelial cell growth factor receptor 2

            硫肝素糖蛋白2檢測試劑盒生長特性: 懸浮生長培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)新生牛血清,10%heparin sulphate protoglycans 2

            卵清蛋白特異性IgG1抗體檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yǎng)條件: IMDM:Iscove'sModiefiedDulbecco'sMedium新生牛血清,20%ovalbumin specific IgG1

            綠色熒光蛋白檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yǎng)條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBSGreen fluorescent protein

            美金剛胺檢測試劑盒生長特性: 貼壁及懸浮生長培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)新生牛血清,10%Memantine

            膜聯(lián)蛋白-A2檢測試劑盒生長特性: 懸浮生長培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)新生牛血清,10%Annexin A2

            內(nèi)皮脂肪酶檢測試劑盒生長特性: 懸浮生長培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)新生牛血清,10%Endothelial lipase

            內(nèi)源性分泌型糖基化終末產(chǎn)物受體檢測試劑盒生長特性: 懸浮生長培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)新生牛血清,10%Endogenous Secretory Receptor for Advanced Glycation Endproducts

            凝溶膠蛋白檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yǎng)條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)胎牛血清,10%Gelsolin

            Ⅷ相關(guān)抗原檢測試劑盒生長特性: 半貼壁生長培養(yǎng)條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)新生牛血清,10%coagulation factor Ⅷ related antigen
            肺癌細胞;L1022土貝母苷甲102040-03-9中文別名:假貝母、地苦膽、草貝  

            英文名:Tubeimoside I  

            CAS登錄號:102040-03-9

            分子式:C63H98O29

            分子量:1319.43

            分子結(jié)構(gòu):

            外觀:無色針晶()

            規(guī)格:20mg/支

            純度:≥ 98%

            用途:用于含量測定/鑒定/藥理實驗等。

            提取來源:土貝母藥材。

            熔點:252-254℃

            藥理藥效:用于乳癰,瘰疬,炎,頸淋巴結(jié)結(jié)核,慢性淋巴結(jié)炎,肥厚性鼻炎。

            貯存條件: 4℃冷藏、密封、避光

            有效期: 2年
            操作步驟:
            1、貼壁細胞的消化
            ①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
            ②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
            ③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
            化;或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的  *細胞培養(yǎng)液,吹打下細胞,即可直接用于后續(xù)實驗。
            ④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
            ⑤如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細胞,即可用于后續(xù)實驗。
            2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。

             

            產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 肺癌細胞 L1022
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